圆二色谱
仪器型号:
Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等
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圆二色光谱仪通过测量生物大分子的圆二色光谱从而得到生物大分子的二级结果。主要应用于蛋白质折叠、蛋白质构像研究、DNA/RNA反应,酶动力学,光学活性物质纯度测量,药物定量分析。
1. 液体样品
1.1 寄送量:液体上样体积常规3ml,稀有样品最低量300ul。测试时需要空白溶剂做对照扣背景,因此样品及溶剂至少各备5ml。
1.2 寄送温度:按照客户样品保存温度寄送,蛋白溶液样品一般为干冰寄送。
2. 固体粉末
2.1 寄送量:固体粉末至少30mg;
2.2 寄送温度:按照客户样品保存温度寄送,粉末样品一般为常温寄送。
3. 块状薄膜
薄膜样本直径大于1cm;块体大小1cm*1cm,按照客户样品保存温度寄送。
1、圆二色谱可以用来测试分析蛋白构象吗
是可以的,这种一般测试波长范围在190-260nm之间
2、圆二对样品纯度有要求吗?
只要是液体样品都可以扫谱图出来,纯度越高结果越准确,仪器本身没有要求,需要看客户对结果的要求。
3、溶剂类型会影响测试结果吗?
会,常用缓冲液(例如PBS,Tri-HCl)浓度最好低于2mM,浓度越低越好,如果不确定可以先测一下溶剂的紫外吸收,不然会影响样品在190-200nm的吸收。如果样品添加其它物质,请先测紫外,确定添加的物质在待测波长范围内的吸收不要太高(吸收值最好不超过3)。无论是溶剂还是添加的物质如果在待测波长范围内吸收太强都会影响CD信号,导致结果不准。
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