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细胞生物平台
细胞迁移/侵袭实验
仪器型号:
Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等
预约次数:
56352次
服务周期:
平均5.0个工作日
13674980622
 
项目介绍
 
细胞迁移 (cell migration) 也称为细胞爬行、细胞移动或细胞运动,是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动。细胞迁移为细胞头部伪足的延伸、新的黏附建立、细胞体尾部收缩在时空上的交替过程。细胞迁移是正常细胞的基本功能之一,是机体正常生长发育的生理过程,也是活细胞普遍存在的一种运动形式。胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移。
1、细胞划痕
细胞划痕(修复)法是一种简捷的测定细胞迁移运动与修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,使用枪头或者其他硬物在单层细胞的中央区划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间(采用低血清或者无血清培养基培养以排除细胞增殖的影响),取出细胞培养板,观察周边细胞是否生长(修复)至中央划痕区,以此判断细胞的生长迁移能力,服务流程如下:
准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)
 (1)先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
  (2)在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
  (3)第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
  (4)用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
  (5)放入37度5%CO2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。
2、细胞侵袭
细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究,服务流程如下:
 
样本要求
 
待测样品(浓度客户指定)、具体实验方案与要求;涉及到的细胞、耗材试剂盒本实验室均可有偿提供。
 
结果展示
 
交付内容:完整实验报告及拍摄图片
 
          细胞划痕实验                                   细胞侵袭实验
 
常见问题
 
 
如何选择细胞划痕法或Transwell法?
细胞划痕:适用贴壁细胞的创伤愈合;
Transwell法:构建细胞共培养体系;趋化性实验;肿瘤迁移/侵袭实验。

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