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分子蛋白平台
Western Blot
仪器型号:
Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等
预约次数:
56352次
服务周期:
平均5.0个工作日
13674980622
 
项目介绍
 
1.简介:
     采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测物是蛋白质,将抗体作为探针,标记的二抗作为显色工具。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝 酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
     以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的二抗发生反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术广泛应用于检测蛋白水平的表达。
2.服务流程:
 
样本要求
 
1、新鲜样品:1、0.1g新鲜组织(至少),干冰运输;
2、细胞:细胞类型样本细胞数为1*106以上),收集细胞后PBS清洗三遍,离心去除上清,干冰运输;
3、若客户提供已提取的蛋白液,蛋白提取方法请参考:心肝脾肾等组织可每50~100mg加1ml裂解液,肺100~200mg加1ml裂解液。加入裂解液前,尽量将组织剪成小块。
4、需提供待测样品的一抗及其说明书(一抗一般为10μl左右,也可由平台代购);其他所涉及的细胞、试剂盒以及生物耗材均可由本平台均有偿提供。
 
常见问题
 
 
1、Western blot为什么背景模糊?
 
2、样品要如何准备?
① 新鲜样品:1、0.1g新鲜组织(至少)2、加入蛋白裂解液,干冰运输;
② 细胞:细胞类型样本细胞数为1*106以上),干冰运输;
③ 对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加1ml裂解液,肺100~200mg加1ml裂解液。加入裂解液前,尽量将组织剪成小块。
④ 需提供待测样品的一抗及其说明书(一抗一般为10μl左右,也可由平台代购);其他所涉及的细胞、试剂盒以及生物耗材均可由本平台均有偿提供。
 
3、为什么条带会出现弥散?

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advantage
我们的优势

仪器设备

借助2000+大型仪器设备和丰富的处理方案,针对各行业研发分析中的难题,提供技术支撑和指导。

技术团队

由20多名博士、100余名硕士组成的技术过硬、经验丰富的技术团队,具备科研检测的核心竞争力。

定制化服务

根据客户需求和行业通用标准,定制化测试方案,全程跟踪测试情况。

能力全面

在华东、华中、华北、西北地区分别建有大型综合检测基地,具有行业顶尖的检验检测分析实验室。