氨基酸，是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，尿液中氨基酸的变化能反映肝、肾的生理状态。另外，氨基酸还能反映灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。

 

氨基酸分析仪测定氨基酸含量
氨基酸分析仪是一种基于液相色谱法（LC）或液质联用法（LC-MS）的精密仪器，用于快速准确地测定样品中氨基酸的种类和含量。这种方法在食品科学、生物化学、临床医学及环境科学等领域广泛应用。
液相色谱法（LC）测定氨基酸含量
● 实验原理：
液相色谱法通常结合离子交换柱分离和柱后茚三酮衍生化技术进行氨基酸的定量检测。样品中的蛋白质首先经过酸水解，释放出游离氨基酸，然后通过阳离子交换柱实现氨基酸的分离。各氨基酸按照它们与离子交换树脂的亲和力差异依次洗脱出来，随后与茚三酮反应生成有色物质，最后在紫外分光光度计或荧光检测器上测定吸光度或荧光强度，从而计算出每种氨基酸的含量。
● 操作步骤：
1. 样品处理：将待测样品进行适当的预处理，包括蛋白质的完全水解以及可能的净化步骤。
2. 样品注入：制备好的样品溶液被注入到氨基酸分析仪的进样口。
3. 色谱分离：氨基酸在特定的离子交换柱上依据电荷和大小的不同得到分离。
4. 茚三酮衍生化：从色谱柱流出的氨基酸立即进入衍生化反应系统，与茚三酮试剂发生反应形成有颜色的衍生产物。
5. 检测与定量：生成的衍生物通过检测器（如紫外吸收检测器），测量其吸光度并转化为浓度值，根据标准曲线计算氨基酸的精确含量。
液质联用法（LC-MS）测定氨基酸含量
● 实验原理：
液质联用法利用高效液相色谱对氨基酸进行初步分离，之后经接口传输至质谱仪进行定性和定量分析。每个氨基酸具有独特的质荷比（m/z），通过检测离子的质量和强度可以准确识别和定量样品中的氨基酸组成。
● 操作步骤：
1. 样品提取与预处理：同样需要先将样品中的蛋白质水解为游离氨基酸，然后进行必要的纯化和浓缩。
2. 液相色谱分离：氨基酸混合物通过液相色谱柱进行高分辨率分离。
3. 质谱检测：分离后的氨基酸组分逐一进入质谱仪，通过电喷雾电离（ESI）或其他离子化方式转化为气态离子。
4. 数据采集与分析：质谱仪记录下各氨基酸离子的质谱图，通过对比数据库信息或标准品谱图来鉴定氨基酸，并根据离子峰强度定量氨基酸含量。

 

样本量：粉末非纯样品一般提供2g左右，溶液样品提供5-10ml（蛋白的大于1mg/mL）。特别注意：氨基酸测试分游离氨基酸和水解氨基酸，需要在测试之前确定好测试内容！ 交付内容:：提供测试谱图及氨基酸浓度数据。 实验周期：收到样品后1-2周左右时间，具体实验周期请预约前与e测试工作人员沟通确认。

 

采用氨基酸分析仪或者高效液相色谱测17种氨基酸（天门冬氨酸，苏氨酸，丝氨酸，谷氨酸，脯氨酸，甘氨酸，丙氨酸，胱氨酸，缬氨酸，蛋氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，赖氨酸，组氨酸，精氨酸）